产品简称
Type IA, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid, For general use
NACRES
NA.54
抗体应用
cell culture | mammalian: suitable;single cell analysis: suitable;diagnostic assay manufacturing
溶解度
TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble
应用
该酶还与其他蛋白酶一起被用于分解人类肿瘤、小鼠肾脏、人脑和肺上皮组织。它还在在肝、肾灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞和肝细胞分离等方面有应用价值。Sigma的该酶用于牛小梁和皮质骨I型胶原的消化。它也被用作B组链球菌细胞FALGPA检测的阳性对照。 适用于制备用于测序的单细胞悬液。
生化/生理作用
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
制备说明
该产品相当于Mandl,I.,等报道的前40%硫酸铵馏分。(Mandl, I., et al., J. Clin.Invest., 32, 1323 (1953).储备溶液制备可在37°C下,将1-2 mg/mL胶原酶溶解于含有TESCA缓冲液(含50mM TES,0.36mM氯化钙,pH 7.4).
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
注意
所提供产品可在-20℃稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃保存30天,无明显的FALGPA和蛋白酶活性损失。如果快速冷冻分装液(10 mg/mL)并保存于-20℃,胶原蛋白酶原液活性稳定。反复冻融会破坏溶液。 本品在冰上置放7小时以上可保留100%活性。